| 概論 ゲノム科学の時代の遺伝子工学-その役割と実践- 山本雅 16 |
| 第1章 核酸の調製 |
| 1. 培養細胞,組織からのDNA,RMAの抽出 酒井正春 20 |
| 2. LCM(Laser Capture Microdissection)を用いた微量の核酸調製 渡這俊樹 24 |
| 第2章 遺伝子クローニング |
| 1. cDNAクローニング |
| I)DNAプローブによるクローニング 野村信夫 32 |
| Ⅱ)抗体によるcDNAクローニング 谷口武利 35 |
| Ⅲ)サウスウエスタンブロット法によるクローニング 宮本昌明 40 |
| Ⅳ)固層リン酸化法によるチロシンキナーゼ標的のクローニング 横山一剛 45 |
| V)two-hybrid system法によるクローニング 村上政男 49 |
| Ⅵ)ファーウエスタンブロット法による発現クローニング 松田覚 55 |
| 2. ディファレンシャルディスプレイ 伊藤隆司 60 |
| 3. Suppression Subtractive Hybridization 松尾俊彦 65 |
| 4. Gatewayクローニング法 曽根岳史 今本文男 70 |
| 5. 突然変異体道伝子の作製法 井川俊太郎 82 |
| 第3章 遺伝子の構造解析 |
| 1. サザンブロットハイブリダイゼーション法 癌細胞等におけるゲノムDNA変化の検出 河野隆志 90 |
| 2. PCR-SSCP法 田平知子 久木田洋児 林健志 95 |
| 3. bisulfite PCR法 鈴木拓 豊田実 今井浩三 99 |
| 第4章 遺伝子の発現解析 |
| 1. ノーザンブロッティング 酒井正春 108 |
| 2. in situイブリダイゼーション組織化学法 深田託成 遠山正彌 113 |
| 3. クロマチン免疫沈降法(ChIP assay) 山下政克 中山俊憲 119 |
| 4. RNaseプロテクションアッセイ 西本正純 124 |
| 5. in vitro転写法 田村隆明 128 |
| 6. RT-PCR,Real-time PCR,5'RACE 江口英孝 134 |
| 7. ゲルシフトアッセイ 石田尚臣 井上純一郎 142 |
| 8. DNase Ⅰフットプリンティング法 田上英明 饗場弘二 147 |
| 第5章 細胞への遺伝子導入と機能解析 |
| 1. トランスフェクション法 |
| I)リン酸カルシウム法 神野茂樹 152 |
| Ⅱ)リボフェクション法 横溝岳彦 157 |
| Ⅲ)エレクトロボレーション法 房木ノエミ 163 |
| 2. ウイルスによる遺伝子導入法 |
| I)アデノウイルスベクターを用いた道伝子発現 鐘ヶ江裕美 斎藤泉 166 |
| Ⅱ)レトロウイルスによる遺伝子導入法 北村俊雄 174 |
| 3. 遺伝子のマイクロインジェクション 千田和広 179 |
| 第6章 遺伝子産物の機能解析 |
| 1. モノクローナル抗体の作製 小谷政晴 久保英夫 184 |
| 2. ポリクローナル抗体の作製 手塚徹 189 |
| 3. 免疫沈降法 秋山徹 194 |
| 4. GST融合タンパク質沈降法 三浦賢司 197 |
| 5. タンパク質検出法 ウエスタンブロッテイングとOverlay法によるタンパク質の特異的検出法 伊藤俊樹 203 |
| 6. バキュロウイルスを用いたタンパク質発現系 久武幸司 210 |
| 7. 質量分析を用いたタンパク質複合体解析 北川浩史 藤木亮次 柳澤純 加藤茂明 216 |
| 8. ルシフェラーゼアッセイ/CATアッセイ 須藤龍彦 223 |
| 9. GFP法 田村照子 Alexandra Koch 227 |
| 10. 細胞,組織の免疫染色による発現解析 渡辺雅彦 231 |
| 11. FRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer)法 望月直樹 238 |
| 12. 培養細胞でのsiRNAによるRANi法 程久美子 善野修平 西郷薫 243 |
| 第7章 個体レベルの解析 |
| 1. トランスジェニックマウスの作製法 安田二朗 岩倉洋一郎 248 |
| 2. ジーンターゲティング |
| I)ターゲテイングベクターの作製とES細胞への導入 中井茂康 山中ひとみ 254 |
| Ⅱ)マイクロインジェクション法による変異マウスの作製 美野輪治 261 |
| Ⅲ)アグリゲーション法による変異マウスの作製 須藤カツ子 岩倉洋一郎 266 |
| Ⅳ)コンデイショナルターゲティング法 雀乗日 岩倉洋一郎 274 |
| 3. マウス胚の凍結保存 横山峯介 278 |
| 第8章 ゲノムプロジェクトからの遺伝子解析 |
| 1. ゲノムDNAクローニング(BAC) 辻厚至 今井高志 284 |
| 2. DNAマイクロアレイ 今井順一 渡辺慎哉 289 |
| 3. 完全長cDNAライブラリーの作製 鈴木穣 菅野純夫 295 |
| 4. RLGS法 奥泉久人 松山知樹 林崎良英 303 |
| 5. SNP解析 井ノ上逸朗 陣内寅佳 311 |
| 6. In silico DNAクローニング 佐谷秀行 317 |
| 7. バイオインフォマティクスによる配列解析 内山郁夫 323 |
| 索引 331 |
| 概論 ゲノム科学の時代の遺伝子工学-その役割と実践- 山本雅 16 |
| 第1章 核酸の調製 |
| 1. 培養細胞,組織からのDNA,RMAの抽出 酒井正春 20 |
図書
