| 「生物化学実験法」編集の趣旨 |
| 第3版へのまえがき |
| 第2版へのまえがき |
| はじめに |
| I. 序説 1 |
| II. 蛋白質の定量法の分類と方法の選択 9 |
| II-1 Kjeldahl法 10 |
| II-2 フェノール試薬法(Lowryらによる改良法) 11 |
| II-3 ビウレット法 12 |
| II-4 紫外線吸収スペクトル法 13 |
| (i) 280nmで測定する方法 13 |
| (ii) 215-225nmで測定する方法 13 |
| II-5 色素結合法 14 |
| (i) Amido Black 10B 14 |
| (ii) Coomassie Brilliant Blue G-250 15 |
| II-6 各定量法の比較 15 |
| II-7 各種微量定量法の特徴と方法の選択 19 |
| II-8 蛋白質微量定量法の問題点 26 |
| (i) 標準蛋白質 26 |
| (ii) 水分含量 26 |
| (iii) 精製酵素など貴重な試料の場合 26 |
| (iv) 共存物質の影響 27 |
| (v) 各定量法の総合的比較 28 |
| III. Kjeldahl法 29 |
| III-1 Kjeldahl分解 29 |
| (i) 方法の原理 29 |
| (ii) 蛋白質成分の分離 30 |
| (iii) 試料の分解条件 31 |
| (iv) 分解時間 35 |
| (v) 分解フラスコ,その他 35 |
| III-2 アンモニアの定量法 37 |
| (i) 蒸留滴定法 38 |
| (ii) Conwayの微量拡散分析法 41 |
| (iii) Nessler法 48 |
| (iv) インドフェノール法 50 |
| (v) サリチル酸を用いるインドフェノール法の応用 54 |
| III-3 直接比色定量する方法 55 |
| (i) ヨードメトリーを応用する方法 58 |
| (ii) Nessler法の応用 59 |
| III-4 蛋白質量の算出 61 |
| III-5 自動分析装置 62 |
| III-6 共存する硝酸塩のアンモニウム化 65 |
| IV. ビウレット法 69 |
| IV-1 可視領域で測定するビウレット法 73 |
| (i) Gornallらの方法 74 |
| (ii) 食品その他,固体試料に使用できる方法 76 |
| IV-2 紫外領域で測定するミクロビウレット法 80 |
| IV-3 金属イオン関与の定量法 85 |
| (i) Ag⁺イオンとジチゾンを用いる微量定量法 85 |
| (ii) ビシコニン酸法 87 |
| V. フェノール試薬法 93 |
| V-1 原理 93 |
| V-2 Lowryらの方法 96 |
| V-3 Lowry法の妨害物質 99 |
| V-4 妨害物質存在下でのLowry法 105 |
| (i) トリクロロ酢酸沈澱法 113 |
| (ii) 濾紙を用いたトリクロロ酢酸沈澱法 115 |
| (iii) SH化合物存在下でのLowry法 116 |
| (iv) Triton X-100存在下でのLowry法 117 |
| V-5 その他の改良法 123 |
| (i) 直線性の検量線を描く改良法 123 |
| (ii) 多数の試料の測定の迅速化のための改良法 123 |
| (iii) プロテアーゼ活性測定への応用 125 |
| (iv) リン酸濃度の高い試料のための改良法 126 |
| (v) 迅速化と感度上昇のための改良法 126 |
| (vi) マラカイトグリーンにより感度を50倍増幅する方法 127 |
| VI. 紫外線吸収スペクトル法 131 |
| VI-1 280nmで測定する方法 131 |
| VI-2 215-225nmで測定する方法 135 |
| VI-3 191～194nmで測定する方法 137 |
| VI-4 224-233.3nmで測定する方法 141 |
| VI-5 235-280nmで測定する方法 143 |
| VI-6 各種蛋白質のεMおよびE1cm^1% 144 |
| VII. 色素結合法 145 |
| VII-1 Amido Black 10B法 150 |
| (i) 色素-蛋白質の沈殿の上澄み色素濃度を測定する方法 150 |
| (ii) メンブランフィルターと色素を用いる微量定量法 150 |
| (iii) 中尾らの方法 154 |
| VII-2 Coomassie Brilliant Blue 155 |
| (i) Bradford法 158 |
| (ii) ReadとNorthcoteの改良法 160 |
| VII-3 濾紙に蛋白質を固定後色素を用いる微量定量法 162 |
| VII-4 Eosin Y法 164 |
| VII-5 トリニトロベンゼンスルホン酸塩法 165 |
| VII-6 Erythrosin B法 165 |
| VIII. 物理的方法,その他 167 |
| VIII-1 屈折率法 167 |
| VIII-2 ラジオアイソトープ法 169 |
| VIII-3 比濁法 171 |
| VIII-4 ニトロ化による簡便法 175 |
| IX. 加水分解法 177 |
| IX-1 ニンヒドリン法 177 |
| IX-2 トリニトロベンゼンスルホン酸法 182 |
| X. 螢光法 185 |
| X-1 フルオレサミン法 187 |
| (i) Böhlen らのフルオレサミン法 188 |
| (ii) メンブランフィルターを用いるフルオレサミン法 191 |
| X-2 OPA法 192 |
| X-3 チアミンによる微量定量法 197 |
| (i) 薄層を使用する方法 198 |
| (ii) 水溶液中での定量法 200 |
| X-4 DNS法 201 |
| X-5 FITC法 201 |
| XI. 結び 203 |
| 文献 207 |
| 索引 217 |
